淺談人鈣黏素ELISA試劑盒的實驗原理和注意事項

　　人鈣黏素ELISA試劑盒的實驗原理：
 

　　該試劑盒使用雙抗體夾心法測定樣本中的人鈣粘蛋白1(PCDH1)水平。用純化的人鈣粘蛋白1(PCDH1)抗體包被微孔板制備固相抗體。依次將原鈣粘蛋白1(PCDH1)加入單克隆抗體包被的微孔板中，然后與HRP標記的原鈣粘素1(PCDH1)抗體結合形成抗體-抗原-酶標記的抗體復合物。*清洗后，添加基質TMB以顯色。
 

　　TMB在HRPase的催化下轉化為藍色，在酸的作用下最終轉化為黃色。樣品中的顏色深度與PCDH1呈正相關。使用微孔板閱讀器測量450nm波長處的吸光度(OD值)，并通過標準曲線計算樣品中PCDH1的含量。
 

　　人鈣黏素ELISA試劑盒的使用注意事項：
 

　　1、試劑盒應在取出冷藏環境并在室溫下平衡15-30分鐘后使用。如果酶標簽的涂層板在啟封后沒有用完，則應將該條儲存在密封袋中。
 

　　2、濃縮洗滌液可能結晶，稀釋時可在水浴中加熱溶解，洗滌時不影響結果。
 

　　3、樣品添加的每個步驟都應使用取樣器，并應經常檢查其精度，以避免試驗誤差。每次采樣時間最好控制在5分鐘內。如果樣本數量較大，建議使用噴槍進行采樣。
 

　　4、請在每次測量的同時制作標準曲線，最好制作多個孔。如果樣品中待測物質的含量過高，請在測量前用樣品稀釋劑稀釋一定次數(n次)，然后在計算時乘以總稀釋比(×n×5)。
 

　　5、密封膜只能使用一次，以避免交叉污染。
 

　　6、使基板遠離光線。
 

　　7、嚴格按照說明書進行操作，測試結果必須根據微板閱讀器讀數確定。
 

　　8、所有樣品、洗滌液和各種廢物應作為傳染性物質處理。